家蚕变应原tropomyosin基因的克隆表达、纯化及其免疫学活性鉴定
刘志刚
邬玉兰
杨睿
吴海强
1.深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所2.深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所3.深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所4.深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所
摘要:目的 对家蚕过敏原tropomyosin基因进行克隆表达,鉴定其免疫学活性.方法 本研究提取家蚕总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出tropomyosin片段,其长度为858 bp,编码286个氨基酸.通过连入载体PET28a在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)菌株中通过IPTG诱导得到重组家蚕原肌球蛋白.重组家蚕原肌球蛋白经过6His-tag蛋白纯化系统分离、纯化.经Western blot检测该重组蛋白与家蚕过敏患者血清中IgE的反应性.结果 19个病人血清反应中,有5个呈阳性,阳性率为26%.结论 成功克隆表达了家蚕tropomyosin基因,经免疫学鉴定发现其具有过敏原性.
关键词:家蚕重组变应原tropomyosin基因表达蛋白纯化
分类号:R34(基础医学)
资助基金:科技部科研项目(2005CB121000)广东省科技重点专项项目(2003A3080502)深圳市科技计划(200326)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 655-658 )
英文信息
