抗人DR5单克隆抗体的制备、鉴定及活性分析
杨东海1
庄国洪1
刘忠臣2
张长弓3
何琼3
李文珠1
1.厦门大学医学院抗癌研究中心2.厦门大学附属中山医院3.厦门市波生生物有限公司
摘要:目的 制备抗人DR5单克隆抗体(mAb),鉴定其特性,并进行生物学活性分析.方法 以纯化的可溶性DR5(sDR5)免疫Balb/c小鼠,杂交瘤技术制备抗人DR5 mAb;运用ELISA、SDS-PAGE电泳方法测定抗DR5 mAb与sDR5结合的特性;Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗DR5 mAb亚类;间接ELISA法检测腹水mAb效价;流式细胞仪检测肿瘤细胞表面DR5的表达水平;流式细胞仪检测抗DR5单克隆抗体(mAb)诱导肿瘤细胞凋亡的功能.结果 获得1株可分泌抗DR5 mAb的杂交瘤细胞系R150.SDS-PAGE电泳检测证实,获得的R150可特异性地识别DR5;R150的Ig亚类为IgGI(λ型);腹水效价为1×106;通过流式细胞仪可敏感地检测到肿瘤细胞表面DR3的表达水平及R150诱导肿瘤细胞凋亡情况.结论 获得1株可分泌抗DR5 mAb的细胞系R150,抗体具有效价高、特异性强等特点并能有效诱导肿瘤细胞凋亡,具有较好的应用价值.
关键词:死亡受体5TRAIL单克隆抗体细胞凋亡
分类号:R34(基础医学)
资助基金:福建省自然科学基金(C0710046)
论文发表日期:2009-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 671-675 )
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