重组毕赤酵母高密度发酵表达肽抗生素hPAB-β及其抑菌活性初步鉴定
侯瑞1
饶贤才2
丛延广2
陈志瑾2
谭银玲2
杨杰2
胡福泉2
1.第三军医大学免疫学教研室,重庆,4000382.第三军医大学微生物教研室重庆市微生物工程实验室,重庆,400038
摘要：目的 探讨hPAB-β工程菌的高密度发酵方法,鉴定发酵产物中目的 肽的活性.方法 采用补料分批培养方法,在3.7L发酵罐中对重组酵母菌进行高密度发酵,温度控制在30℃,pH值范围为4.95～5.05,在菌体湿重达到200-250 g/L后开始诱导,经过约50 h甲醇诱导后结束发酵.对发酵上清进行反相层析、分子筛层析以及反相高效液卡相色谱纯化.通过抑菌实验对纯化产物进行活性鉴定.结果 3次高密度发酵在菌体湿重分别达到235.0 g/L、210 g/L和264.8 g/L时进行诱导表达.发酵上清中目标肽的表达量分别达73.7 mg/L、76.6 mg/L和74.3 mg/L.发酵上清通过反相层析、分子筛层析以及反相高效液相色谱纯化,获得重组肽抗生素hPAB-β.该重组蛋白经抑菌实验显示了较好的抑菌活性.结论 成功实现了酵母工程菌的高密度发酵,为下一步规模化制备hPAB-β奠定了基础.
关键词：肽抗生素hPAB-β毕赤酵母高密度发酵
分类号：Q815(生物工程学(生物技术))
资助基金：全军攻关课题(06G075)重庆市科技攻关计划(CSTC.2005AB5021)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 6-9,20 )
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