Luffin P1-KDEL的构建、表达、纯化及鉴定
刘树雷1
何威2
王儒鹏2
吴军3
胡小红3
1.400037重庆,第三军医大学附属新桥医院皮肤科;400032重庆,中国人民解放军324医院2.第三军医大学附属新桥医院皮肤科,重庆,4000373.第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所,重庆,400038
摘要：目的 构建植物毒素Luffin P1的原核表达质粒PET32a(+)一Luffin P1,并对其进行诱导表达,以及表达蛋白的纯化及鉴定.方法 采用基因工程技术将重组基因片段Luffin P1克隆到表达载体pET32a(+)中,经酶切及DNA序列分析正确后,转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达Luffin P1融合蛋白,并用His标签抗体对该融合蛋白进行Western blot鉴定,对鉴定正确的融合蛋白进行纯化,肠激酶酶切及再纯化.结果 成功的构建了原核表达载体pET32a(+)-Luffin P1,获得了纯度较高的Luffin P1蛋白.结论 通过基因工程合成Luffin P1蛋白是成功的,并为进一步对Luffin P1功能研究及制备免疫毒素的弹头鉴定了实验基础.
关键词：免疫毒素核糖体失活蛋白Luffin P1
分类号：R34(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30771933)重庆市科研基金;解放军324医院,院管课题(CSTC;2007BB5089)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 16-20 )
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