检测外周血MUC1蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步应用
马吉春
柳忠辉
方芳
窦蕊
赵小霞
张庆勇
陈文博
台桂香
1.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,1300622.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,1300623.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,1300624.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,1300625.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,1300626.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,1300627.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,1300628.吉林大学白求恩医学院免疫教研室,长春,130062
摘要：目的 为提高外周血MUC1蛋白检测的敏感度,建立了抗MUC1多克隆抗体的夹心ELISA试剂盒,并对其进行了初步测试.方法 首先成功构建-表达并纯化了MUC1-GST和MUC1-MBP融和蛋白;通过免疫家兔和大鼠,获得抗MUC1血清,经饱和硫酸铵沉淀、Protein A/G纯化及抗GST和MBP抗体吸收的进一步纯化获得纯的家兔抗人及大鼠抗人MUC1多克隆抗体;通过凝血酶溶解MUC1-GST获得MUCI标准品.经不同的筛选确立了以家兔抗人MUC1抗体作为包被抗体、大鼠抗MUC1抗体作为检测抗体的双抗体夹心试剂盒,敏感度可达到0.2 ng/ml.结果 对32例乳腺癌患者和20例健康受试者外周血血清中MUCl蛋白水平的检测结果显示,乳腺癌患者的阳性检出率达到53.1%(17例,32例),而健康对照组检出率为0.结论 本研究建立的抗MUC1多克隆抗体双夹心试剂盒有望应用于临床诊断.
关键词：MUC1抗MUC1多克隆抗体双抗体夹心ELISA腺癌诊断
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：吉林省科技发展计划支撑重点项目(20080931)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 49-52,55 )
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