CFSE标记结合流式细胞术在研究NK细胞分裂与杀伤功能中的应用
范艳莹
吴长有
1.中山大学中山医学院免疫学教研室热带病防治研究教育部重点实验室,广州,5100802.中山大学中山医学院免疫学教研室热带病防治研究教育部重点实验室,广州,510080
摘要：目的 建立并优化CFSE标记结合流式细胞术检测人NK细胞分裂、增殖和杀伤功能的方法.方法 利用CFSE标记磁珠纯化的人NK细胞,加或不加IL-2进行培养.分别在第3、5、7天收集细胞,流式细胞术对NK细胞的分裂增殖进行检测;利用IL-2活化NK细胞作为效应细胞,与靶细胞(K562细胞)按不同效靶比在37℃5%CO_2培养箱共孵育4 h加入碘化丙啶(PI),流式细胞术检测CFSE~+PI~+K562细胞(死亡的靶细胞)的百分率.结果 CFSE标记的NK细胞在IL-2的作用下第5天即可观察到细胞增殖,至第7天80%以上的NK细胞均发生增殖,分裂1～6次.在对NK细胞杀伤功能的研究中,发现IL-2刺激后NK细胞的杀伤功显著增强.此外,当IL-2或IL-12活化的NK细胞作用于不同的靶细胞时,均可有效地杀伤靶细胞.结论 以CFSE标记技术结合流式细胞术可在单细胞水平客观精确地对NK细胞的增殖、分裂和杀伤功能进行分析.本方法灵敏度高、操作简便易行、重复性好,对其他淋巴细胞亚群功能的研究具有重要的借鉴意义.
关键词：CFSENK细胞细胞分裂杀伤功能
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30671898)高等学校博士学科点专项科研基金(20070558213)广东省自然科学基金(8451008901000131)广东省医学科学技术研究项目(A2009161)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 63-67 )
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