逆转录病毒载体介导的RNAi技术抑制HeLa细胞CD59表达及功能的研究
石学香1
高美华2
方建红3
1.青岛市疾病预防控制中心,2660332.青岛大学医学院免疫学教研室,2660713.青岛市城阳区人民医院妇产科,266021
摘要：目的 构建针对CD59基因的RNAi逆转录病毒载体并感染HeLa细胞,观察CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用的变化.方法 应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,构建3条含特异性CD59基因的重组载体,并以无关序列作为对照,脂质体法转染包装细胞并感染Hela细胞,RT-PCR和ELISA检测靶细胞上CD59基因的抑制效果,染料释放试验检测CD59功能的改变.结果 重组载体经鉴定正确,转染包装细胞成功,RT-PCR和ELISA结果显示能显著抑制CD59基因的表达,染料释放试验显示f扰组对补体溶破的抵抗作用降低.结论 特异性沉默CD59基因的逆转录病毒载体构建和筛选成功,并能抑制CD59基因的表达及减弱CD59对补体的抑制功能,为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础,可望为肿瘤的免疫治疗开辟新途径.
关键词：shRNACD59逆转录病毒载体补体
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30671936)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 98-101 )
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