HIV-1蛋白酶基因的克隆、蛋白表达及抗体制备
史继静1
刘朝奇2
李斌1
汪锦江2
陈晶2
1.三峡大学分子生物学研究所,宜昌,4430022.三峡大学医学院,宜昌,443002
摘要：目的 为了研究HIV-1蛋白酶的生物学活性,制备HIV-1 PR蛋白及其特异性抗体.方法 用PCR方法扩增编码PR的基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,并表达HIV-1 PR蛋白,用His抗体为一抗做Western blot鉴定目的 蛋向.以纯化的目的 蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体.通过酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫细胞化学法检测抗体滴度及其特异性.结果 原核表达载体pET28 a(+)-PR成功构建,并可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到的PR蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定正确.用纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性.结论 得到纯化的HIV-1PR蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白PR,为进一步研究HIV-1奠定了实验基础.
关键词：HIV-1PR基因原核表达免疫原性多克隆抗体
分类号：R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 116-119 )
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