Syncytin蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备和鉴定
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1.650223,中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室;100049,中国科学院研究生院;650011,云南省第一人民医院检验科2.中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室,6502233.650223,中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室;100049,中国科学院研究生院
摘要：目的 克隆人syncytin基因并在大肠杆菌中表达,并用表达后的融合蛋白制备syncytin蛋白多克降抗体.方法 PCR扩增人syncytin基因编码区的DNA片段,将其克隆人原核表达质粒pET30a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导产生syncytin-His融合蛋白.采用割胶回收的方法纯化目的 蛋白,免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体.通过ELISA、Western-Blot和免疫组织化学等方法来检测抗体的灵敏度和特异性.结果 成功表达并纯化了syncytin-His融合蛋白,SDS-PAGE分析表明融合蛋白主要以包涵体形式存在;ELISA法测定抗体效价为1:10000:Western-Blot和免疫组织化学结果显示所制备的抗体能特异性识别syn-cytin蛋白.结论 成功制备和鉴定了人svncvtin多克隆抗体,多克隆抗体特异性强和效价高,为下一步研究Syncytin的生物学功能奠定了基础.
关键词：Syncytin原核表达多克隆抗体
分类号：R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 124-127,131 )
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