功能性重组人巨噬细胞移动抑制因子(hMIF)的制备及鉴定
倪敏
易维京
张阳
张竹君
李鹏
李淑慧
陈安
胡川闽
1.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,4000382.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,4000383.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,4000384.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,4000385.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,4000386.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,4000387.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,4000388.第三军医大学医学检验系临床生化教研室,重庆,400038
摘要：目的 制备具有生物学活性的重组人巨噬细胞移动抑制因子(hMIF),为进一步研究MIF的功能和筛选MIF阻断剂奠定基础.方法 构建PET11b-MIF、PET32a-MIF表达载体,建立重组MIF纯化方案,通过体内、体外实验对不同表达方式的重组hMIF互变异构酶活性、促进炎症因子释放,加重脓毒症动物死亡率的作用进行对比研究.结果 成功表达了两种重组hMIF,建立并优化了重组MIF的纯化方法,发现PET11b-MIF表达的的MIF经SP Sepharose FF阳离子交换层析和Hitrap 26/60sephacryl S-300分子筛纯化后具有明显的互变异构酶的活性,能剂量依赖性地刺激RAW264.7细胞释放NO和TNF-α、IL-6,并加重了脓毒症动物的死亡率.而PET32a-MIF表达的N端带有Trx标签的hMIF(Tr-hMIF)无上述作用.结论 我们成功制备了具有生物学活性的MIF,为深入研究MIF的功能和筛选MIF阻断剂奠定了基础.
关键词：巨噬细胞移动因子脓毒症互变异构酶活性阻断剂
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：863项目(2006AA02A247)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 290-293,298 )
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