HBV颗粒的纯化及生物学活性鉴定
曾兴光1
石统东2
韩俊峰1
邹丽云1
谢谆怡1
刘宏利1
吴玉章1
1.40038重庆,第三军医大学,基础医学部全军免疫学研究所2.重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所,400013
摘要：目的 优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法.方法 在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖.PCR荧光定量检测HBV超滤液;电镜观察70 000 g纯化后的HBV超微形态;70 000 g纯化后的HBV颗粒感染树嗣肝细胞,检验70 000 g纯化后的HBV感染活性.结果 100 000 g离心造成大量HBV在离心过程中损失,收获率只有21%,70 000 g离心不仅降低了离心中的病毒损失,而且可有效对HBV和血清进行分离,收获率达到78%以上,较100 000 g还提高3.7倍多.电镜可观察到纯化后病毒液中有大量的病毒颗粒;纯化后的HBV颗粒感染活性良好,可有效感染原代树鼩肝细胞.结论 70 000 g不连续蔗糖梯度离心可有效分离纯化HBV病毒,较100 000 g收获率明显提高,纯化后的HBV不但具有典型的HBV特征,还具有良好的生物学感染活性.
关键词：乙型肝炎病毒不连续蔗糖梯度离心纯化树鼩肝细胞
分类号：R392(医学免疫学)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 340-343 )
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