人GLIPR-2基因的克隆及在原核中可溶性表达
黄绍光1
李强1
钮芹2
倪丹妮1
蒲晓允1
1.第三军医大学附属新桥医院检验科,重庆,4000372.第三军医大学附属新桥医院心内科,重庆,400037
摘要：目的 构建pQE80L-GLIPR-2载体,并检测融合蛋白RGS·His-GLIPR-2在原核中的表达水平.方法 采用RT-PCR方法,将克隆人GLIPR-2(glioma pathogenesis related-2,GLIPR-2)基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pQE80L中,经IPTG诱导原核表达,通过Western blot检测融合蛋白RGS·His-GLIPR-2的表达水平.超声破壁后,通过SDS-PAGE电泳分析表达产物的表达形式.结果 成功构建pQE80L-GLIPR-2载体;经IPTG的诱导,GLIPR-2可与RGS·His以融合蛋白的形式高效表达.经Western blot鉴定,pQESOL-GLIPR-2在原核内表达产物相对分子质量为18 000,与预期融合蛋白大小一致.对表达产物可溶性分析表明,表达蛋白在上清液中和包涵体中均有表达.结论 成功构建的重组质粒能够在大肠杆菌中高效表达可溶性目的蛋白,为进一步研究GLIPR-2基因的功能和意义奠定了基础.
关键词：GLIPR-2单个核细胞基因克隆基因表达肾纤维化
分类号：R34(基础医学)R692.6(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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