Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白D在杆状病毒表达系统中的表达、纯化及免疫效果评价
姜德玉1
刘坤2
张伟1
周朋1
李君丽1
王希良2
于三科3
1.712100,杨凌,西北农林科技大学动物医学学院;10071,北京,军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室2.军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100713.西北农林科技大学动物医学学院,杨凌,712100
摘要：目的 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白D(gD2)进行表达,纯化后评价其免疫效果,以探索HSV-2重组亚单位疫苗的研制.方法 提取HSV-2 DNA作为模板,用聚合酶链式反应(PCR)扩增gD2基因,克隆至pFastBac HTA载体中,利用载体中的His基因标记gD2,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达His-gD2融合蛋白,表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot检验,用镍柱进行纯化,免疫小鼠评价其免疫原性.结果 HSV-2 gD2在昆虫细胞Sf9中得到特异性表达,纯化后的重组蛋白诱导小鼠体内产生高水平的IgG抗体及中和抗体.结论 gD2基因在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中获得表达,表达产物表现出良好的免疫原性及中和活性,为发展HSV-2亚单位疫苗奠定了基础.
关键词：Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白DBac-to-Bac杆状病毒表达系统免疫原性中和活性
分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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