淋球菌LOS 2C7表位筛选及其与HBc融合蛋白的原核表达
张伟1
刘坤2
姜德玉1
赵莉群1
李君丽1
于三科3
王希良2
1.712100,陕西,杨陵,西北农林科技大学动物医学学院;100071,北京,军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室2.军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,1000713.杨陵,西北农林科技大学动物医学学院,陕西,712100
摘要：目的 将淋球菌脂寡糖的2C7表位插入乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的MIR区,通过原核表达系统进行融合蛋白的表达,以期获得高免疫原性的淋球菌亚单位疫苗的候选靶位.方法 通过间接ELISA法,以CMCC29403菌株的LOS为包被抗原,对7个表位进行筛选;并通过杀菌试验检测肽段免疫动物产生血清的保护力.对已筛选好的肽段基因进行人工合成,通过重叠PCR将肽段基因嵌入HBc基因中,以增强表位的免疫原性,并进行原核表达.结果 初步研究表明了表位PEP1,PEP2,PEP7具有较强的脂寡糖(LOS)的免疫原性,能够模拟脂寡糖的抗原性.这3个肽段可能成为候选疫苗亚单位.通过重叠PCR方法成功地将PEP1,PEP2,PEP7三个表位基因序列插入乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的刺突(MIR)部位,构建了HBc-PEP1,HBc-PEP2,HBc-PEP7融合基因,通过PET22b(+)载体进行原核表达,为下一步疫苗的研究奠定了基础.结论 2C7表位PEP1,PEP2,PEP7具有较强的脂寡糖(LOS)的免疫原性,能够模拟脂寡糖的抗原性.表位与HBc的融合蛋白可以通过原核表达系统进行可溶性表达,为下一步疫苗的研究奠定基础.
关键词：2C7 表位淋球菌脂寡糖(LOS)乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)原核表达
分类号：R378.1+6(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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