鸡蛋主要过敏原Gal d1片段基因的克隆、表达、纯化及免疫学鉴定
马艳梅1
黄钟1
刘志刚2
闫浩3
王和平4
罗新萍1
孔小丽1
1.深圳大学医学院,5180602.518060,深圳大学医学院;518060,深圳大学医学院呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室3.深圳大学医学院呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室,5180604.深圳市儿童医院内五科,518026
摘要：目的 克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原Gal d1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定.方法 用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原Gal d1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增Gal d1 N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32a上.重组质粒转入大肠杆菌,用IPTG诱导表达,通过镍亲和柱层析法纯化重组蛋白,最后用Westernblotting检测重组蛋白的免疫原性.结果 表达的蛋白均以可溶性为主,N端融合蛋白相对分子质量为28 600,C端融合蛋白相对分子质量为26 800,纯化的N端和C端蛋白均有较好的免疫原性,C端的免疫原性强于N端.结论 成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原基因Gal d1的N端和C端,为鸡蛋过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础.
关键词：鸡蛋过敏原Gal d1克隆表达
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：深圳市科技计划(JC200903130238A)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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