人Snapin基因片段的原核表达及多克隆抗体的制备
张沙沙
陈中
赵钟钟
孙晓莉
袁秀杰
张朝
1.南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室,2100462.南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室,2100463.南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室,2100464.南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室,2100465.南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室,2100466.南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室,210046
摘要：目的 制备兔抗人Snapin的多克隆抗体,检测其特异性以及Snapin蛋白在心脏组织中的分布.方法 构建pGEX-4T-1-Snapin N/C质粒,通过原核表达和纯化分别获得带有snapin基因N端(1-54Aa)和C端(60-136Aa)表达产物(融合蛋白GST-Snapin N/C),通过多点皮下注射免疫新西兰家兔,多次免疫后获得血清,用Protein G Agrose亲和纯化血清,获得IgG型高效价抗Snapin多克隆抗体.结果 经过ELISA检测发现二种抗体效价高,滴度在1:256 000时仍有较强信号.用Western blotting以及免疫组织化学检测发现二种抗体的特异性良好,能特异性识别小鼠心脏组织Snapin蛋白,其中尤以抗Snapin C抗体为佳.结论 成功制备出高效价、强特异性的抗Snapin N/C抗体,为进一步研究Snapin蛋白在心脏中的作用提供了条件.
关键词：Snapin多克隆抗体心脏
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30570662)科技部重大科学研究计划(2006CB943503)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息