表达hβ2m-A24单链的RMA-S细胞系的构建及鉴定
王燕
程婷婷
陈晓蔚
丁洁
1.南京市疾病预防控制中心,2100032.南京市疾病预防控制中心,2100033.南京市疾病预防控制中心,2100034.南京市疾病预防控制中心,210003
摘要：目的 构建人类白细胞抗原HLA-A24真核表达载体,并使其在小鼠细胞RMA-S获得稳定表达.方法 采用PCR方法扩增出HLA-A24基因的重链,将其克隆到含轻链β2m的真核表达载体pcDNA3.1上,构建成表达完整HLA-24分子的真核表达载体.用限制性内切酶酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒,电转染RMA-S细胞,药物筛选稳定细胞系.蛋白印迹法和流式细胞鉴定HLA-A24分子在靶细胞表面的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1/A24真核表达载体,并使LA-A24分子在HLA-A24阴性的小鼠RMA-S细胞表面获得稳定表达.结论 真核表达载体成功构建和稳定转染RMA-S细胞系的建立为进一步研究HLA-A24人群中多种疾病的细胞免疫、筛选和鉴定合适的T细胞抗原表位奠定了基础.
关键词：HLA-A24PCR真核表达载体hβ2m-A24-A2TMRMA-S-A24细胞系
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：南京市卫生局重大项目(ZKX08020)南京市医学科技发展重大项目(2007)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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