人Ⅱ型胶原的HLA-A*0201限制性CTL表位的预测及初步鉴定
陈晓玲1
方勇飞2
尚小云1
王书峰1
高乐女2
王莉1
吴玉章1
1.第三军医大学免疫学研究所,重庆,4000382.第三军医大学西南医院中西医科,重庆,400038
摘要:目的 预测和初步鉴定类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)主要自身抗原Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,CⅡ)的HLA-A*0201限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)表位,为基于CⅡ抗原表位的特异性免疫治疗奠定基础.方法 选取B1MAS、SYFTEPITHI、IEDB、SVMHC、AntiJen预测工具预测该抗原HLA-A*0201限制性结合肽;人工合成待测表位肽,利用T2细胞株通过直接免疫荧光法测定各肽与HLA-A*0201分子的结合力.利用酶联免疫斑点检测(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)方法检测候选肽刺激关节滑液单个核细胞(synovial fluid mononuclear cell,SFMC)分泌IFN-γ的能力.结果 综合BIMAS、SYFTEPITHI、IEDB、SVMHC、AntiJen预测结果筛选出来可能与HLA-A*0201结合的5条肽.MHC亲和力实验表明,在候选的5条肽中,P1261、P1365及P1399具有与HLA-A*0201分子结合的能力,平均荧光强度分别为:1.35、2.53、1.78.ELISPOT试验结果表明,P1365具有刺激SFMC分泌IFN-γ的能力.结论 表位预测结果与初步鉴定结果具有一致性,两者联合应用初步认为P1365是HLA-A*0201限制性CTL表位的可能性最大,为下一步表位鉴定及基于人CⅡ抗原表位的特异性免疫治疗奠定理论基础.
关键词:HLA-A*0201CTL结合肽表位限制性
分类号:R392.9(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(30901337)国家重点基础研究发展计划(973计划)(2007CB512401)
论文发表日期:2010-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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