RhoA突变体的构建及稳定表达
宋富强
陈炜
王嘉丽
张俊磊
胡晓梅
1.第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室,重庆,4000382.第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室,重庆,4000383.第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室,重庆,4000384.第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室,重庆,4000385.第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室,重庆,400038
摘要：目的 构建pCI-V14RhoA、pCI-N19RhoA、pCI-WtRhoA真核表达载体,筛选出稳定表达细胞克隆株,为进一步研究RhoA在登革病毒感染过程的作用奠定工作基础.方法 构建活化突变型的pCI-V14RhoA、显性负性突变型pCI-N19RhoA及野生型pCI-WtRhoA真核表达载体,稳定转染至ECV304细胞,通过间接免疫荧光染色和免疫印迹实验进行鉴定.结果 经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒pCI-WtRhoA、pCI-V14RhoA、pCI-N19RhoA构建正确;经间接免疫荧光染色和免疫印迹实验验证,稳定表达细胞克隆株命名为ECVWtRhoA、ECVV14RhoA、ECVN19RhoA.结论 成功建立了真核表达质粒pCI-WtRhoA、pCI-V14RhoA、pCI-N19RhoA;成功建立了稳定表达细胞克隆株ECVWtRhoA、ECVv14RhoA、ECVN19RhoA,为后续研究积累了有价值的实验资料.
关键词：病毒细胞骨架RhoA
分类号：R373.33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(30972596)第三军医大学青年创新人才基金(2009XQN10)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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