ERK干扰质粒的构建及对胃癌细胞株BGC823DcR3表达的影响
范鑫
庄国洪
黄小平
杨东海
刘彬
程小峰
刘忠臣
1.厦门大学医学院抗癌研究中心,3610052.厦门大学医学院抗癌研究中心,3610053.厦门大学医学院抗癌研究中心,3610054.厦门大学医学院抗癌研究中心,3610055.厦门大学医学院抗癌研究中心,3610056.厦门大学医学院抗癌研究中心,3610057.厦门大学医学院抗癌研究中心,361005
摘要：目的 探讨胃癌发展的分子机制,通过构建ERK1/2 shRNA真核表达载体,体外研究其对人胃癌细胞株BGC823ERK1/2蛋白及DcR3表达水平的影响.方法 应用PRNAT-U6.1/Neo载体构建ERK1/2基因shRNA重组质粒,经脂质体法导人BGC823细胞中,分别设置对照组、干扰组和U0126抑制剂组.Westem blot法检测转染后BGC823细胞及抑制剂使用后ERK1/2蛋白的表达变化,荧光显微镜检测质粒自带GFP基因的表达情况确认转染效率,ELISA法检测各组细胞上清中DcR3分泌蛋白的表达特点.结果 成功构建ERK1/2基因shRNA重组质粒.证明了ERK1/2蛋白的表达与DcR3的分泌水平在BGC823细胞株中呈正相关.结论 ERK1/2干扰质粒明显降低BGC823细胞的ERK1/2蛋白表达水平,ERK信号通路对DcR3的分泌具有重要调控作用,为其下游调控机制的研究奠定了基础.
关键词：ERK1/2基因DcR3RNA干扰胃癌
分类号：R392.3(医学免疫学)
资助基金：厦门市科技计划项目(3502Z20083008)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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