肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体制备、鉴定及初步应用
晁耐霞
肖飞
蒋日婷
黄天明
赵飞兰
曾庆堂
李日伦
谢小薰
罗国容
1.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300212.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300213.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300214.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300215.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300216.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300217.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300218.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,5300219.广西医科大学组织胚胎学教研室,广西,530021
摘要：目的 制备本课题组报告的肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性.方法 以本课题组前期构建的人MBP-Kinectin融合片段重组质粒为基础,原核表达和亲和层析大量纯化MBP-Kinectin融合蛋白,并免疫新西兰兔制备多克隆抗体;用间接ELISA法测定抗体效价,用Western blot鉴定抗体的特异性.同时用Kinectin多克隆抗体检测Kinectin在正常成人肝细胞HL-7702和人肝癌细胞株SMMC-7721内的表达.结果 通过免疫新西兰兔获得抗Kinectin抗体,ELISA测定纯化的Kinectin抗体效价最高为1:12 800.Western blot结果显示Kinectin抗体具有较好的特异性.免疫细胞化学和western blot 检测发现Kinectin蛋白在肝癌细胞株内的表达显著高于正常成人肝细胞株.结论 制备的抗Kineetin抗体具有较高的效价和特异性,能满足Western blot和免疫细胞化学检测Kinectin蛋白的要求,为进一步深入研究Kinectin在肝癌发生发展中的作用奠定基础.
关键词：多克隆抗体肝细胞癌肿瘤相关抗原Kinectin
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：广西自然科学基金重点项目(2010GXNSFD013048)广西高校人才小高地建设创新团队资助计划(BGXZ2007010)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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