肿瘤睾丸抗原OY-TES-1氨基端截短蛋白及其多克隆抗体的制备
陈玉升1
韦连登2
范蓉3
罗彬2
何少健2
林永达2
陈芳2
谢小薰2
肖绍文1
1.广西医科大学第一附属医院神经外科,南宁,5300212.广西医科大学第一附属医院基础医学院,南宁,5300213.广西中医学院,南宁,530001
摘要：目的 获得原核表达的OY-TES-1氨基端截短蛋白(OY-TES-1-N),并制备其多克隆抗体.方法 扩增编码OY-TES-1-N 268个氨基酸(A6-R273)的cDNA序列;将PCR产物插入原核表达载体pMAL-C2,构建重组质粒,并转化DH50α菌;通过蓝白斑筛选、DNA测序筛出阳性菌;在优化条件下用IPTG对阳性菌进行诱导表达MBP/OY-TES-1-N融合蛋白;上Amylose resin亲和层析柱纯化,行Western blot鉴定.以融合蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备抗血清,经活化琼脂糖微球纯化后,采用ELISA法及Western blot法分别检测抗血清的效价和多克隆抗体的特异性.结果 成功诱导表达出MBP/OY-TES-1-N融合蛋白.以该蛋白免疫新西兰兔制备抗血清,抗体效价为1:1 000,Western blot检测证实该抗体能与目的 蛋白发生特异性结合.结论 成功地表达并纯化了MBP/OY-TES-1-N融合蛋白,并制备了特异性多克隆抗体.
关键词：OY-TES-1融合蛋白克隆纯化多克隆抗体
分类号：R739.4(神经系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(30760055)广西自然科学基金(0832144)广西大型仪器协作网资助项目(666-2008-079;691-2008-104;2007-59)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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