罗丹明B单克隆抗体的的制备及鉴定
熊友华1
高爱中2
任东明1
丁旭贝2
王磊1
1.三峡大学医学院免疫学重点实验室,宜昌,4430022.广州优抗多生物技术有限公司,510000
摘要:目的 制备抗罗丹明B[9-(2-羧基苯基)-3,6-双(二乙氨基)]小鼠单克隆抗体(mAb),初步鉴定其特性,为罗丹明B快速检测方法的开发奠定基础.方法 采用活性酯法使罗丹明B偶联于载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA),合成免疫抗原罗丹明B-BSA和检测抗原罗丹明B-OVA.将罗丹明B-BSA免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术获得杂交瘤细胞株17F2,并通过对添加回收率的测定初步建立了罗丹明B的快速检测方法.结果 将该细胞株注射Balb/c小鼠制备腹水mAb,腹水纯化后效价为1:1.28×10<'5>.属于IgG1型.罗丹明B mAb的灵敏度为0.05μg/L,IC<,50>为0.42 μg/L.mAb与丁基罗丹明B、异硫氰酸罗丹明B、罗丹明6G、5-羧基四甲基罗丹明、罗丹明110、丽丝胺罗丹明B、罗丹明123的交叉反应率均小于0.3%.辣椒油中罗丹明B的添加回收率在80.6%~104.4%之间,变异系数在16.0%~28.8%之间.结论 制备出的罗丹明B mAb为研制罗丹明B的快速检测方法奠定了基础.
关键词:罗丹明B单克隆抗体ELISA胶体金
分类号:R392(医学免疫学)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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