HPV16E7基因慢病毒载体的构建及鉴定
赖云建
周春丽
王儒鹏
何威
1.第三军医大学新桥医院皮肤科,重庆,4000372.第三军医大学新桥医院皮肤科,重庆,4000373.第三军医大学新桥医院皮肤科,重庆,4000374.第三军医大学新桥医院皮肤科,重庆,400037
摘要：目的 构建HPV16 E7慢病毒表达载体.方法 用RT-PCR方法从Caski细胞中扩增HPV16 E7基因的编码区序列,对扩增出目的片段酶切纯化后将目的片段交换连接入慢病毒表达质粒,酶切鉴定并测序正确后进行慢病毒包装和滴度测定.Western-blot验证3FLAG-E7融合蛋白在293 T细胞中的表达.结果 成功获得HPV16 E7基因.成功将HPV16 E7克隆到慢病毒表达质粒中,且包装产生的慢病毒颗粒能成功表达3FLAG-E7融合蛋白.结论 成功构建HVP16 E7和flag基因共表达的慢病毒表达载体,为进一步研究HPV16 E7基因的功能建立了高效稳定的转基因技术平台.
关键词：HPV16E7基因慢病毒载体293T细胞
分类号：R392.32(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30972646)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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