gp350及gp350-C3d3融合基因真核载体的构建及其免疫功能研究
宋天喜1
曹朝晖2
江伟凡2
董世访2
杨桦1
1.第三军医大学新桥医院耳鼻咽喉头颈外科,重庆,4000372.南华大学生物化学与分子生物学教研室,衡阳,421000
摘要：目的:构建EB病毒包膜糖蛋白gp350伞长序列及其与3个补体片段C3d串联基因在人体真核细胞中表达的载体,并进行其免疫功能的初步研究.方法:将gp350基因序列分别与经BglⅡ和BamHⅠ双酶切的真核表达载体pSG.SS.YL和pSG.SS.C3d3.YL连接,转化后挑取阳性克隆进行PCR、酶切鉴定并测序;将重组载体利用脂质体法分别转染人类Hela细胞培养16-24h后,用Western blot及细胞免疫组化染色检测gp350蛋白和gp350-C3d3融合蛋白的表达.结果:成功构建含gp350全长基因序列的载体pSG.SS.gp350.YL和pSG.SS.gp350.C3d3.YL,并能够转染人类Hela细胞;经细胞免疫组织化学染色及Western blot蛋白检测转染组均能常规水平表达,对照组则无该蛋白表达,但两转染组的表达量无明显差异.结论:构建成功含有gp350的2个真核表达质粒并能够在人体细胞中表达相应蛋白,为下一步进行检测功能性试验奠定基础.
关键词：EB病毒鼻咽癌gp350DNA疫苗
分类号：R766.3(咽科学、咽疾病)R739.63(耳鼻咽喉肿瘤)R73-36+2(肿瘤学实验研究)
资助基金：重庆市自然科学基金(CSTC2006BB5108)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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