H-2Kd四聚体的制备及其在检测特异性同种CTLs中的应用
陈雪玲1
严永祥2
唐婕2
翁秀芳2
吴雄文2
1.832002,石河子大学医学院免疫学教研室430030;武汉,华中科技大学同济医学院免疫学系2.华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030
摘要：目的:制备H-2Kd限制性胰岛GAD抗原肽/H-2Kd四聚体并用于检测相应的特异性同种CTL.方法:以原核表达的sH-2Kd-BSP为重链,β2m为轻链,与人工合成的GAD抗原肽在体外利用稀释法进行共折叠复性得到单体.然后在BirA酶作用下对其进行生物素化,通过凝胶过滤层析法纯化生物素化的复合物单体,再与Strep-tavidin-FITC按4:1比例混合形成四聚体;取Balb/c小鼠(H-2Kd)巨噬细胞加载胰岛GAD抗原肽,作为刺激细胞,取C3H小鼠脾细胞(H-2Kd)作为效应细胞,在体外进行混合淋巴细胞培养,以获得针对H-2Kd限制性胰岛GAD抗原肽的特异性同种CTL.结果:该四聚体能够与长期混合淋巴细胞培养出的同种特异性T细胞结合.结论:成功构建胰岛GAD抗原肽/H-2Kd四聚体,并可用于针对H-2Kd限制性胰岛GAD抗原肽特异性同种CTL的检测.
关键词：GAD抗原肽/H-2Kd四聚体特异性CTL同种反应
分类号：R392.33(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81060227)石河子大学人才启动基金(RCZX200829)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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