SA11株轮状病毒VP3基因的克隆表达及致病机制的初步研究
李明1
何海洋2
徐广振3
尹怡3
薛毅3
吴玉章2
李晋涛2
1.400038重庆,第三军医大学学员旅;第三军医大学全军免疫学研究所2.第三军医大学全军免疫学研究所3.第三军医大学学员旅,重庆,400038
摘要：目的 克隆、真核表达SAll株轮状病毒VP3基因,对其致病机制进行了初步研究.方法 用RT-PCR从SAll株总RNA中扩增出VP3基因,并克隆到真核表达载体pEGFP-C1上,构建重组表达载体pEGFP-C1/VP3,用荧光显微镜及Western blot检测VP3基因在真核细胞(293T细胞)的表达情况.以重组质粒pEGFP-C1/Rb94为对照,用流式、荧光显微镜、Westernblot观察VP3蛋白对GFP基因表达的抑制作用.结果 在293T细胞中检测到VP3基因的表达;pEGFP-C1/VP3组的流式荧光强度、Western blot的蛋白条带大小均明显弱于pEGFP-C1/Rb94对照组.结论 成功构建了pEGFP-C1/VP3真核穿梭表达载体,在真核细胞中有效表达,实验结果 提示VP3蛋白可能对宿主细胞大分子蛋白的表达有抑制作用,可能是轮状病毒的一种新的致病机制.
关键词：轮状病毒VP3基因真核表达致病机制
分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30400402)重庆市科技攻关计划(CSTC2009AB5197)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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