人CD83基因转染细胞株的构建及其功能初步研究
陈礼文1
高超2
沈双3
仲维学3
朱一蓓3
张学光4
1.215007,苏州大学医学生物技术研究所;230601合肥,安徽医学高等专科学校2.215007,苏州大学医学生物技术研究所;224001,江苏省盐城市中心血站3.苏州大学医学生物技术研究所,2150074.215007,苏州大学医学生物技术研究所;215006,苏州大学附属第一医院临床免疫室
摘要：目的 构建人CD83全长编码基因转染293细胞,并探讨其对单核细胞的作用.方法 RT-PCR方法 从成熟人树突状细胞(DC)扩增出CD83 cDNA,插入plRES2-EGFP载体,脂质体转染293细胞,筛选出稳定表达目的 基因细胞株;从人外周血单个核细胞(PBMC)中磁珠分选单核细胞,LPS刺激的同时加入293/CD83细胞或293/mock,24 h后检测细胞活化状态以及培养上清中TNF-c水平.结果 经流式细胞术反复检测绿色荧光蛋白(GFP)报告基因及CD83表达水平,筛选获得获得一株稳定表达膜型CD83分子的基因转染细胞株293/CD83;体外实验显示293/CD83可促进LPS刺激的单核细胞活化水平和TNF-c分泌量.结论 成功构建表达人CD83分子的293细胞株,293/CD83对LPS刺激的单核细胞有协同刺激作用.
关键词：树突状细胞转染免疫调控细胞活化TNF-α
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30700728)安徽省高等学校省级自然科学研究项目(KJ2011B072)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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