重组人碱性成纤细胞生长因子单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用
车莹1
李校堃2
胡培声3
颜江华4
姚娜5
蔡琳3
林绍强3
王生育4
朱佳男5
1.130118长春,吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;吉林农业大学生命科学学院2.130118长春,吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;325035,温州医学院浙江省生物技术制药工程重点实验室3.温州医学院浙江省生物技术制药工程重点实验室,3250354.厦门大学抗癌研究中心,3610055.吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,长春,130118
摘要：目的 制备重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF)单克隆抗体,鉴定其特性,建立双抗体夹心ELISA检测方法.方法 以rhbFGF为免疫原,免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗rhbFGF杂交瘤细胞株,制备抗rhbFGF单克隆抗体,采用Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗体亚类,间接ELISA法检测抗体效,Western blot鉴定抗体特异性.HRP标记McAb并建立夹心ELISA检测方法.结果 获得2株(分别命名2D3、5F7)可分泌特异性McAb的强阳性细胞株,腹水抗体效价在10 5以上,IgG亚类均为IgGl,轻链为K链.Western blot证明2株McAb特异性良好,双抗体夹心ELISA检测rhbFGF最低检测限达到2 ng/ml.结论 成功制备高效价的抗rhbFGF单克隆抗体,建立抗rhbFGF双抗体夹心ELISA定量检测方法.
关键词：碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体夹心ELISA
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：温州医学院科研基金(5010)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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