一株中和人IL-17免疫活性的单克隆抗体的制备
孙阳
谷学佳
叶贤龙
徐黎明
陈睿
任桂萍
王秋颖
丁良军
李德山
1.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500302.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500303.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500304.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500305.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500306.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500307.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500308.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,1500309.东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,哈尔滨,150030
摘要:目的 制备抗人IL-17单克隆抗体,并鉴定其中和活性.方法 用hIL-17作为免疫和检测抗原,用间接ELISA法筛选分泌抗人IL-17抗体的杂交瘤细胞株,并对抗体进行中和活性鉴定.结果 获得1株稳定分泌抗人IL-17单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型重链为IgG2b,轻链为κ;该株杂交瘤细胞腹水效价为1:8.192×105;传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定;Western Blot检测证明该单抗与人IL-17蛋白特异地结合;单抗亲和常数为8.192×10-9mol/L;ELISA及Realtime-PCR检测证明该单抗能够有效地阻断人IL-17刺激Hela细胞产生IL-6的作用.结论 所制备的抗人IL-17单克隆抗体具有高度的特异性、稳定性及中和活性,为针对IL-17为靶点的抗体药物的开发奠定了基础.
关键词:人白细胞介素-17单克隆抗体中和活性IL-6
分类号:Q78(基因工程(遗传工程))
资助基金:国家自然科学基金(31001084)哈尔滨市科技创新人才研究专项(2010RFQXN109)哈尔滨市科技创新人才发展计划项目(2006RFXXS002)东北农业大学创新团队发展计划(CX2001)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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