鸟氨酸脱羧酶抗酶融合蛋白高表达对小鼠黑素瘤细胞B16-F1细胞周期的影响
刘梦瑶
韩钰
蔡富强
何玲
王艳林
1.三峡大学医学院分子生物学研究所,宜昌,4430022.三峡大学医学院分子生物学研究所,宜昌,4430023.三峡大学医学院分子生物学研究所,宜昌,4430024.三峡大学医学院分子生物学研究所,宜昌,4430025.三峡大学医学院分子生物学研究所,宜昌,443002
摘要：研究鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ)与绿色荧光蛋白融合蛋白GFP-OAZ1和GFP-OAZ2高表达对小鼠黑色素瘤B16-F1细胞周期的影响.构建GFP-OAZ1和GFP-OAZ2融合基因的真核表达质粒并经脂质体法瞬时转染B16-F1细胞,然后用Western blot分析法和荧光显微镜下观察融合蛋白在B16-F1细胞中的表达.流式细胞分析用于检测GFP-OAZ融合蛋白高表达对B16-F1细胞周期的影响.Western blot分析法鉴定GFP-OAZ融合蛋白高表达对B16-F1细胞中鸟氨酸脱羧酶(ODC)酶蛋白水平的影响.结果成功构建的GFP-OAZ1和GFP-OAZ2融合基因B16-F1细胞中正确高效表达.经流式细胞检测发现,OAZ1和OAZ2融合蛋白高表达导致细胞G0/G1期阻滞.当用OAZ1和OAZ2分别与ODC共转染B16-F1细胞时,OAZ1融合蛋白高表达显著性减低细胞内ODC蛋白水平,但OAZ2融合蛋白高表达无此种影响.结论成功构建GFP-OAZ1和GFP-OAZ2融合基因的真核表达载体,OAZ1和OAZ2融合蛋白高表达均能将B16-F1细胞阻滞于G0/G1期,但仅OAZ1融合蛋白能显著性促进ODC降解,OAZ2融合蛋白无此种功能.
关键词：OAZ1OAZ2融合蛋白真核表达细胞周期
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30772590)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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