鼠Mincle蛋白B细胞抗原表位预测及多克隆抗体制备
郑小莉1
张艺2
谢晓东3
罗波1
刘佳佳4
1.泸州医学院基础医学院生物化学教研室,6460002.泸州医学院基础医学院医学机能实验室,6460003.泸州医学院教务处实习科,6460004.泸州医学院基础医学院免疫学教研室,646000
摘要：预测鼠Mincle蛋白的B细胞抗原表位及制备其多克隆抗体.以鼠Mincle蛋白氨基酸序列为基础,利用signalP3.0和TMHMM Server在线软件分析其信号肽和跨膜结构,利用DNAstar软件预测其二级结构、蛋白骨架区的柔韧性、亲水性、表面可能性及表面抗原性指数；融合表达PET30a(+)/Mincle蛋白并通过镍层析柱纯化后,免疫兔获得Mincle多克隆抗体.结果Mincel蛋白是一种跨膜蛋白质,N末端第1-22号氨基酸可能位于蛋白的表面并可能为抗原表位；成功构建了重组载体PET30a(+)/Mincle,转化大肠杆菌BL21后表达包涵体融合蛋白,利用镍亲和层析得到了无生物活性的高纯度重组蛋白,纯化蛋白免疫兔,制备了滴度达1:128 000的多克隆抗体；Western-blot检测显示抗体特异性高.结论Mincle蛋白N端即胞外区的第1-22氨基酸可作为Mincle蛋白的主要抗原表位区以制备Mincle多克隆抗体.
关键词：鼠Mincle蛋白B细胞抗原表位多克隆抗体
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：四川省卫生厅项目(100208)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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