GPI修饰的ESAT-6核酸疫苗的构建及其免疫功能初探
何向锋1
王净2
余方流1
赵枫姝1
张洪义1
陈峻崧1
陈登宇1
曹文虎1
窦骏1
1.东南大学医学院病原生物学与免疫学系, 南京,2100092.附属中大医院妇产科
摘要：构建糖基化磷脂酰肌醇(GPI)修饰的结核杆菌早期分泌性抗原靶(ESAT-6)核酸疫苗,初步分析其免疫功能.方法利用重叠PCR法构建pIRES-ESAT-6-gpi重组体,转染B16F10细胞,G418筛选阳性克隆,用RT-PCR、免疫荧光检测转染细胞的ESAT-6抗原表达情况；采集ESAT-6核酸疫苗免疫鼠血清,分别检测抗体滴度和CDC效应,免疫磁珠法分选CD4+和CD8T细胞,CFSE/7-AAD细胞毒实验分析CTL细胞毒活性.结果测序正确的重组体pIRES-ESAT-6-gpi转染细胞后,ESAT-6表达于细胞膜表面.ESAT-6核酸疫苗免疫血清和CD8+T细胞分别通过CDC效应和细胞毒作用杀伤膜表达ESAT-6的B16F10细胞.结论构建的GPI修饰的ESAT-6核酸疫苗能够诱导免疫鼠产生体液和细胞免疫反应,杀伤膜表达ESAT-6的B16F10细胞,为进一步基于该法构建B16F10瘤苗的抗肿瘤免疫效应及机制研究奠定了基础.
关键词：B16F10ESAT-6GPI核酸疫苗
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81071769)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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