SOCS1沉默增强树突状细胞抗喉癌免疫效应
远洋1
王雪峰1
张扬2
江祺川1
李兵3
1.辽宁医学院第一附属医院耳鼻喉科,锦州,1210012.北京大学第三医院普外科,1001913.辽宁医学院附属第一医院眼科,锦州,121001
摘要:研究SOCS1沉默的树突状细胞特异性抗肿瘤作用机制,并探讨RNAi技术在喉癌基因治疗中的应用前景,为树突状细胞的临床应用提供新思路和理论依据.方法以细胞因子GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导扩增外周血单核细胞来源的DC,倒置显微镜下观察DC形态特征;构建RNAi载体转染DC,Western blot检测SOCS1的表达情况,筛选抑制SOCS1表达的有效靶序列;流式细胞术检测DC表面分子CD83、CD86和HLA-DR的表达;ELISA法分析上清中IFN-γ的含量;MTT法评估DC刺激T细胞增殖的能力及诱导细胞毒性T细胞的杀伤活性.结果DC体外诱导培养成功;设计的RNAi载体经测序验证无误.干扰序列5可显著下调SOCS1表达水平;SOGS1沉默联合喉癌Hep-2抗原致敏的DC可显著上调表面分子标志CD83(85.61±0.96)%、CD86(96.86±1.20)%和HLA-DR(98.02±0.94)%的表达;该组DC能有效刺激T细胞增殖,增加IFN-γ的分泌量,最终增强CTL的特异性杀伤作用,效靶比为50∶1时其杀伤活性显著高于对照组(P<0.01).结论SOCS1沉默并负载喉癌Hep-2抗原的DC可以产生高效而特异性的抗喉癌免疫应答.
关键词:细胞因子信号转导抑制因子1小干扰RNA树突状细胞喉癌
分类号:R730.51(一般性问题)
资助基金:辽宁省自然科学基金(20082180)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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