Ara h2三聚体重组蛋白的制备及其低致敏原性鉴定
易海涛
汤慕瑾
刘志刚
闫浩
夏立新
1.深圳大学过敏反应与免疫学研究所深圳出入境检验检疫局,5180602.深圳大学过敏反应与免疫学研究所深圳出入境检验检疫局,5180603.深圳大学过敏反应与免疫学研究所深圳出入境检验检疫局,5180604.深圳大学过敏反应与免疫学研究所深圳出入境检验检疫局,5180605.深圳大学过敏反应与免疫学研究所深圳出入境检验检疫局,518060
摘要：目的 制备花生主要过敏原Ara h 2三聚体重组蛋白并检测其过敏原性.方法 利用分子生物学的方法将3分子的Ara h 2依次串联起来,并将其整合到原核表达载体pET-32a(+),再转化到感受态Origami中;然后利用IPTG诱导其表达;通过Ni2+亲和层析纯化三聚体重组蛋白;Western-blotting和ELISA检测目的蛋白的过敏原性.结果 测序结果表明Trimer成功整合到pET-32a(+)上.三聚体重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,蛋白大小与理论值相符.Western-blotting和ELISA结果表明Trimer与重组的Ara h 2(r-Ara h 2)蛋白相比,结合花生过敏病人混合血清中IgE的能力有所降低.结论 成功制备花生主要过敏原Ara h 2三聚体重组蛋白,初步的体外实验表明该重组蛋白具有低致敏原的潜能.
关键词：花生过敏原Ara h 2三聚体低致敏
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30871752)深圳出入境检验检疫局科技项目(SZ2008105)深圳大学创新团队基金(200904)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息