雪卡毒素单克隆抗体的制备及鉴定
张彩霞
闫鸿鹏
郑杰
周丽华
张焜
赵肃清
1.广东工业大学轻工化工学院制药工程,广州,5100062.广东工业大学轻工化工学院制药工程,广州,5100063.广东工业大学轻工化工学院制药工程,广州,5100064.广东工业大学轻工化工学院制药工程,广州,5100065.广东工业大学轻工化工学院制药工程,广州,5100066.广东工业大学轻工化工学院制药工程,广州,510006
摘要：目的 制备雪卡毒素的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定.方法 以雪卡毒素类似物莫能菌素为半抗原,分别采用混合酸酐法将其与载体牛血清白蛋白(BSA)偶联合成免疫抗原M-BSA,碳二亚胺法与卵清白蛋白(OVA)偶联合成包被抗原M-OVA.以M-BSA免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤.以自制雪卡毒素提取物为竞争抗原,间接竞争ELISA法筛选稳定分泌雪卡毒素抗体的特异性细胞株.小鼠体内诱生腹水,辛酸硫酸铵沉淀法进行纯化.采用抗体亚型鉴定试剂盒鉴定所得抗体的亚型,间接竞争ELISA法鉴定抗体的特异性和交叉性.结果 获得3株稳定分泌抗雪卡毒素抗体的杂交瘤细胞株1D5、2G11、3G11,其Ig亚型均属于IgG1亚型.交叉反应结果表明3株单克隆细胞产生的抗体除与莫能菌素有较高的交叉反应外,与其他雪卡毒素类似物均无明显交叉反应.结论 成功筛选到了分泌雪卡毒素抗体的细胞株,为雪卡毒素免疫分析方法的进一步研究奠定基础.
关键词：雪卡毒素莫能菌素单克隆抗体间接竞争ELISA
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(20872020)广东省自然科学基金(8251009001000005)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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