基于PSCA的肽-DNA复合疫苗的构建及其免疫学效应的检测
刘勇
靳凤烁
张克勤
1.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,4000422.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,4000423.第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科,重庆,400042
摘要：目的 设计、制备和鉴定PLL-PSCA 14-22/-pcDNA3.1 (+)-PSCA复合疫苗及其免疫学效应的检测.方法 将带正电荷的多聚赖氨酸(PLL)通过化学方法与PSCA的一个CTL表位肽PSCA14-22偶联,将上述阳离子多肽PLL-PSCA 14-22与带负电荷的编码PSCA的重组质粒pcDNA3.1 (+)-PSCA利用正负电荷相吸作用制备靶向PSCA的肽-DNA复合疫苗；通过DNA阻滞实验和DNase Ⅰ保护实验鉴定制备的疫苗；将制备成功的复合疫苗体外转染Hela细胞,通过RT-PCR检测该疫苗的转染效率；并进一步通过LDH释放实验检测该疫苗对PSCA阳性的前列腺癌细胞系LNCaP的特异性杀伤效应.结果 当PLL-PSCA 14-22多肽与pcDNA3.1 (+)-PSCA重组质粒正负电荷比≥2时,DNA电泳条带完全消失,即重组质粒pcDNA3.1 (+)-PSCA完全被PLL-PSCA14-22多肽所包裹,复合疫苗可有效抵抗DNase Ⅰ的消化作用.RT-PCR结果表明该复合疫苗在体外可有效转染Hela细胞,且当正负电荷比为64时出现较高的转染效率,并且能够有效激发CTL应答杀伤LNCaP细胞.结论 成功构建的靶向PSCA的多肽-DNA复合疫苗可有效转染真核细胞,诱导CTL应答杀伤前列腺癌细胞,该研究为进一步体内动物实验探讨该疫苗对前列腺癌的免疫治疗效应奠定了基础.
关键词：PSCA前列腺癌复合疫苗
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30872586)重庆市自然科学基金(CSTC;2008BB5015)第三军医大学回国人员启动基金(2007XG62)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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