抗人DR5单链抗体噬菌体展示文库的建立和筛选
刘瑞敏1
季泽俊2
孙颖川1
张爱红1
朱诗白1
白慧玲1
马远方1
1.河南大学医学免疫学研究所院细胞与分子免疫学重点实验室,开封,4750042.475004开封,河南大学医学免疫学研究所院细胞与分子免疫学重点实验室;473000,南阳医学高等专科学校第一附属医院药剂科
摘要：目的 应用噬菌体展示技术构建抗人DR5 (death receptor 5,DR5)单链抗体(single chain Fv,scFv)文库,从中筛选抗DR5 scFv.方法 利用重组人DR5抗原免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸PCR将VH和VL基因拼接成scFv基因,以SfiⅠ位点定向插入PAK100噬菌粒载体,转化E.coli XL1-Blue,构建了库容为1×106的抗DR5单链抗体库.对抗体库进行5轮富集筛选后,phage-ELISA检测阳性克隆的抗原特异性,取1株阳性克隆进行测序分析.结果 抗DR5 scFv基因序列长747 bp,编码249个氨基酸,具有和DR5结合的特异性.结论 本文利用噬菌体抗体库筛选到了抗DR5 scFv,为研制临床免疫治疗的新型抗体奠定了实验基础.
关键词：噬菌体展示技术死亡受体5单链抗体
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：传染病预防控制国家重点实验室开放基金(2008SKLID308)河南省科技攻关计划重点项目(0224630174)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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