CD59锚定蛋白对CD3介导Jurkat细胞活化信号转导中的增强效应
王娟
高美华
张蓓
1.青岛大学医学院免疫学教研室,2660712.青岛大学医学院免疫学教研室,2660713.青岛大学医学院免疫学教研室,266071
摘要：目的 用前期构建好的CD59pSUPER-RNAi质粒转染Jurkat细胞,探讨CD59特异性沉默前后CD59对CD3介导Jurkat细胞活化信号转导的相关作用.方法 采用Lipofectamine2000转染Jurkat细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞系,利用RT-PCR检测转染后CD59在基因水平的表达抑制效果.实验分为未转染的Jurkat细胞组(A组),转染空质粒pSUPER组(B组)和转染CD59pSUPER-RNAi质粒的Jurkat细胞组(C组),用噻唑蓝(MTT)比色法,Western blot技术和激光共聚焦扫描显微镜分别检测交联CD59单抗与固相化CD3单抗联合作用对3组Jurkat细胞的增殖效应,ZAP-70酪氨酸磷酸化的水平及细胞浆内钙离子的变化.结果 重组载体转染后,经G418筛选得到稳定转染细胞系,RT-PCR结果表明转染CD59pSUPER-RNAi质粒的Jurkat细胞组CD59分子的表达受到抑制.转染干扰质粒Jurkat细胞组CD59与CD3联合作用后细胞增殖能力,ZAP-70酪氨酸磷酸化水平及钙离子浓度均明显低于未转染组和转染空质粒组(P＜0.05)；但未转染组和转染空质粒组之间无差异.结论 CD59对CD3介导T细胞活化信号转导有增强效应.
关键词：CD59CD3Jurkat细胞信号转导增强效应
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金资助项目(3170893)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息