沉默NF-κB p65基因下调TNF-α诱导的肺泡上皮细胞的炎症反应
吴炜景1
李跃飞2
李理3
李伟峰3
黄文杰3
1.510515广州,南方医科大学研究生院;510010广州,广州军区广州总医院呼吸内科2.广州军区机关门诊部,广州,5100803.广州军区广州总医院呼吸内科,广州,510010
摘要：目的 建立急性肺损伤体外细胞炎症模型,探讨NF-κB p65基因沉默减轻细胞炎症、保护肺结构细胞的可行性.方法 以TNF-α( 10 ng/ml)刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),运用RNA干扰技术沉默NF-κB p65基因,采用RT-PCR及Westernblotting法检测沉默效率,ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10等炎症因子浓度.结果 TNF-α刺激A549细胞可在基因水平上调NF-κB p65的表达,并增加NF-κB蛋白的核转位,上调细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10的浓度；预转染NF-κB p65 siRNA可在基因水平及蛋白水平有效沉默NF-κB p65表达,降低上述各炎症因子浓度(P＜0.05).结论 急性肺损伤体外细胞炎症模型构建成功,RNA 干扰技术能有效沉默该模型NF-κB p65基因,下调炎症反应水平,保护肺泡上皮细胞,为急性肺损伤免疫调控机制的研究和基因靶向治疗提供实验依据.
关键词：核因子κBRNA干扰细胞因子A549细胞
分类号：R563.1(呼吸系及胸部疾病)R563.8(呼吸系及胸部疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81070003)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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