鸡MHC Ⅰ类分子的多抗制备及其在不同MD抗性MHC单倍型鸡脾脏中的差异表达
高彩霞
李行
杨柳
武永淑
蔡文博
张伟
韩建林
韩凌霞
1.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所2.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所3.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所4.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所5.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所6.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所7.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所8.150001,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;730070兰州,甘肃农业大学动物科学技术学院;100193,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
摘要：目的 制备能检测不同MHC-B单倍型MHC Ⅰ类蛋白的多抗血清,并对马立克氏病(MD)抗性较强的BW/G3系鸡群(MHC B2单倍型)和敏感性较强的BW/G7系鸡群(B19单倍型)接种马立克氏病毒(MDV)后,利用Western blot技术半定量分析MHC Ⅰ类蛋白表达量的差异.方法 从BW/G3系鸡脾组织cDNA中PCR扩增BF基因的保守序列第4～8外显子,克隆入原核表达载体pET-30a,构建重组质粒.转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得表达,经SDS-PAGE初步纯化,免疫新西兰兔,制备兔抗血清.以高效价的兔抗血清为一抗,对BW/G3和BW/G7系健康鸡和MDV攻毒后11周的脾组织进行Western blot,利用ImageQuant 5.2软件半定量分析其中MHC Ⅰ类蛋白含量的变化.结果 含BF部分基因的重组质粒在大肠杆菌中表达,其特异性兔抗血清能检测到不同MHC-B单倍型鸡的MHC Ⅰ类蛋白.BW/G3和BW/G7系鸡群感染MDV后,MHC Ⅰ类蛋白含量全部上调,正常组和攻毒组中BW/G7系的表达量均极显著高于BW/G3系(P≤0.01,P≤0.001).结论 成功制备了能检测MHC B2、B6和B19单倍型鸡的MHC Ⅰ类蛋白特异性多抗血清；MDV攻毒后期,抗性鸡BW/G3和敏感鸡BW/G7脾组织中MHC Ⅰ类蛋白的表达量都发生上调,且易感鸡中的表达量高于抗性鸡,为进一步揭示病毒性肿瘤病的致病机理提供了思路.
关键词：MHC Ⅰ类蛋白兔多抗血清蛋白差异表达
分类号：R392.11(医学免疫学)R373.1+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(31101800)基本科研业务费项目(NKLVBP200828;SKLVBP201006)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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