2型猪链球菌组氨酸三聚体蛋白家族05SSU1267的克隆、表达及免疫保护作用研究
侯田青1
郭静静1
邵珠卿2
李先富3
王长军4
潘秀珍4
1.210046,南京师范大学生命科学学院;210002南京,南京军区军事医学研究所2.210093,南京大学生命科学院;210002南京,南京军区军事医学研究所3.南京军区军事医学研究所,南京,2100024.210002南京,南京军区军事医学研究所;210046,南京师范大学生命科学学院
摘要：目的 对2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,S suis 2)05ZYH33组氨酸三聚体蛋白家族(Histidine triad protein,Htp)成员编码基因05SSU1267进行克隆、表达,并研究其免疫保护作用.方法 根据05ZYH33基因组编码的05SSU1267基因序列设计引物,PCR扩增目的片段.将目的基因克隆入原核表达载体pET32a,并转化E.coli BL21(DE3).通过IPTG诱导表达、His-Tag亲和层析柱纯化获得重组蛋白,并将纯化后的蛋白用于Westem blot分析.以纯化的重组蛋白免疫新西兰兔制备兔多抗血清,并通过ELISA检测多抗血清的效价.重组蛋白免疫Balb/c小鼠,研究其免疫保护作用.结果 Western blot显示重组蛋白可以与兔抗05ZYH33全菌血清反应,显示该蛋白具有较好的免疫反应原性；ELISA结果显示重组蛋白免疫新西兰兔后获得高效价的多抗血清；动物保护实验表明该蛋白具有一定的免疫保护作用.结论 在原核系统成功表达了05ZYH33 Htp蛋白05SSU1267,动物实验结果表明其能够在Balb/c小鼠中发挥一定的免疫保护作用,研究结果为Htp蛋白作为2型猪链球菌疫苗候选分子以及进一步了解该蛋白家族的生物学功能奠定基础.
关键词：2型猪链球菌组氨酸三聚体蛋白原核表达免疫保护
分类号：R378.1+2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(81071317)江苏省自然科学基金(BK2010113)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息