发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及初步应用
徐言1
曾晓燕2
焦永军2
张国强3
张黎2
罗兰3
金秋1
张建平1
史智扬2
1.南京医科大学第二附属医院普外科,2100112.江苏省疾病预防控制中心卫生部肠道病原微生物重点实验室, 南京,2100093.无锡鑫连鑫生物医药科技有限公司,214135
摘要：目的 制备发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒( SFTSV)核衣壳蛋白(NP)的单克隆抗体,并探讨其在该病诊断中的作用.方法 克隆NP基因,构建原核表达载体pComb 3XSS-NP,并转化大肠杆菌Top10F',经诱导表达,纯化获得6HIS-NP融合蛋白.以该融合蛋白免疫Balb/c小鼠,经杂交瘤技术制备NP的鼠源单克隆抗体.经鉴定后,选择1株1C8-C6进行大量制备、纯化,并偶联辣根过氧化物酶(HRP),用该酶标抗体对SFTSV感染人的急性期血清进行Western blot检测.结果 成功表达、纯化SFTSV重组的NP.经小鼠免疫、细胞融合和ELISA筛选后,共获得4株鼠源单克隆抗体.具较高滴度的1C8-C6酶标抗体能与SFTSV感染人的急性期血清中的NP在Western blot水平上结合,而与汉坦病毒、登革热病毒感染人急性期血清及正常人血清不反应.结论 SFTSV NP的表达及其单抗的制备为该病的实验室诊断奠定了基础.
关键词：发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)核衣壳蛋白(NP)单克隆抗体(mAb)
分类号：R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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