双抗体间接夹心ELISA法检测乳腺癌患者外周血MUC1蛋白水平的评价
乔彩霞1
王凤丽2
孙霞霞2
李莹莹2
马吉春3
倪维华2
高素君1
台桂香2
1.吉林大学白求恩第一医院肿瘤中心, 长春,1300122.吉林大学白求恩医学院免疫系, 长春,1300123.镇江市第一人民医院,212000
摘要：目的 优化双抗体问接夹心ELISA试剂盒,并探讨其在乳腺癌患者中检测MUC1黏蛋白水平的应用价值.方法 用基因重组MUC1-GST和MUCl-MBP融和蛋白免疫家兔和大鼠,获得抗MUC1血清,并对其纯化,获得纯化的家兔抗人及大鼠抗人MUC1多克隆抗体；经不同的筛选确立了以家兔抗人MUCl抗体作为包被抗体、大鼠抗人MUC1抗体作为检测抗体的双抗体问接夹心试剂盒,敏感度可达到0.2 ng/ml.结果 应用建立的试剂盒对40例乳腺癌,18例乳腺良性疾病和120健康对照者血清中MUC1蛋白水平的进行检测,检则结果绘制ROC曲线,分析得出以2.75 ng/ml为乳腺癌患者与乳腺良性疾病患者的临界值,以1.86 ng/ml为乳腺疾病与正常人为临界值,检测结果表明本研究对乳腺癌诊断的阳性率高达97.5％,乳腺良性疾病的阳性率为66.7％,正常人特异性为96.7％.对于乳腺癌同一病例样本用酶联免疫法CA15-3诊断试剂盒进行对比检测,其检出率为3.33％,特异度为100％.绘制ROC曲线对比显示,本研究所建立的双抗体夹心ELISA方法对乳腺癌诊断的准确度明显高于CA15-3试剂盒.结论 本研究成功建立了特异性强,灵敏度良好的双抗体间接夹心ELISA试剂盒,有望开发为临床辅助诊断的常规试剂盒,尤其有望应用于乳腺癌的大规模筛查及早期诊断.
关键词：MUC1抗MUC1多克隆抗体ELISA试剂盒乳腺癌
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30972782)吉林省科技厅项目(20080931)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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