ADAM10真核表达载体的构建及其对MCF-7增殖迁移的影响
黄巍1
李小鸥2
周丽荣1
黄晓刚1
刘桥1
1.武汉市医学科学研究所基础医学研究室,4300142.武汉大学人民医院儿科,430060
摘要：目的 构建ADAM10真核表达载体,观察稳定转染乳腺癌细胞MCF-7后对其增殖和迁移的影响.方法 利用PCR技术扩增人ADAM10的基因片段,克隆人pcDNA3.1真核表达载体,阳性克隆通过PCR、酶切和测序鉴定.脂质体法将重组质粒转染MCF7细胞,通过C418筛选出稳定转染ADAM10的细胞株,通过Western blot检测细胞ADAM10的表达,通过MTT法和Tramwell法分别检测细胞的增殖和迁移变化.结果 经PCR、酶切和测序鉴定证明ADAM 10真核表达载体构建成功,Western blot结果显示稳定转染细胞的ADAM10蛋白高表达,MTT实验显示转染细胞增殖速度稍快于对照(P＜0.05),Transwell结果 显示转染细胞迁移能力比对照强(P＜0.01).结论 成功构建ADAM10真核表达载体,稳定转染MCF-7细胞后可增强细胞的增殖和迁移,为进一步研究ADAM10生物学作用奠定基础.
关键词：ADAM10真核表达MCF-7细胞细胞增殖细胞迁移
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81000094)武汉市卫生计生委科研项目(WX08C16;WX10B13)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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