凡纳滨对虾主要过敏原-原肌球蛋白单克隆抗体的制备及其过敏原表位分析
黄建芳
王彩霞
向军俭
吕思
黄晟
1.暨南大学抗体工程研究中心 广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106322.暨南大学抗体工程研究中心 广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106323.暨南大学抗体工程研究中心 广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106324.暨南大学抗体工程研究中心 广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106325.暨南大学抗体工程研究中心 广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,510632
摘要：目的 制备凡纳滨对虾主要过敏原-原肌球蛋白的单克隆抗体(mAb),运用它们和虾过敏患者血清分析凡纳滨对虾原肌球蛋白的过敏原表位.方法 纯化的凡纳滨对虾原肌球蛋白免疫Balb/c小鼠,间接ELISA和Western blot筛选并建立稳定分泌抗原肌球蛋白抗体的杂交瘤细胞株;腹水型mAbs经硫酸铵沉淀、Protein G亲和层析纯化;叠加ELISA分析mAbs的抗原结合表位,虾过敏患者血清IgE与mAbs的抑制Western blot和间接竞争ELISA分析原肌球蛋白的过敏原表位.结果 共筛选出5株mAbs,它们之间叠加ELISA的叠加值均高于40％;其中B5和A5能显著抑制虾过敏患者血清IgE与原肌球蛋白的结合,抑制率分别为58.1％和48.6％,同时也能抑制66.7％和44.3％的血清IgE与虾蛋白粗提液反应.结论 成功制备了5株分别结合原肌球蛋白不同抗原表位的单克隆抗体,其中B5和A5能结合其过敏原表位.
关键词：凡纳滨对虾主要过敏原原肌球蛋白单克隆抗体过敏原表位
分类号：R392.12(医学免疫学)R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30640026)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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