Tim-3、PD-1和CD28表达与慢性乙肝患者肝脏iNKT细胞功能的关系
杨志欣
陈春波
雷宇
任红
石统东
1.400010,重庆医科大学附属第二医院感染病科 重庆医科大学病毒性肝炎研究所2.400010,重庆医科大学附属第二医院感染病科 重庆医科大学病毒性肝炎研究所3.400010,重庆医科大学附属第二医院感染病科 重庆医科大学病毒性肝炎研究所4.400010,重庆医科大学附属第二医院感染病科 重庆医科大学病毒性肝炎研究所5.400010,重庆医科大学附属第二医院感染病科 重庆医科大学病毒性肝炎研究所
摘要：目的 研究慢性乙肝患者肝脏中恒定自然杀伤T (invariant nature killer T,iNKT)细胞的功能与其表面Tim-3、PD-1、CD28表达的关系.方法 无菌分离人体肝脏单个核细胞,建立α-半乳糖神经酰胺(α-GalCer)诱导慢性HBV感染后的iNKT细胞体外诱导扩增模型,以流式细胞术检测体外培养基线水平0h和72 h的iNKT细胞的表面Tim-3、PD-1、CD28的表达以及IL-4、IFN-γ的分泌情况;用ELISA法检测培养上清中IL-4、IFN-γγ的水平;阻断PD-1、Tim-3及活化CD28信号通路,以流式和ELISA法检测IL-4+iNKT与IFN-γ+ iNKT.结果 慢性乙肝患者(实验组)肝脏中的iNKT细胞的比例明显低于正常人(对照组)(P＜0.05);iNKT表面Tim-3、PD-1的表达明显增多(P＜0.05),而CD28的表达则明显减少(P＜ 0.05);iNKT细胞分泌IL-4、IFN-γγ的功能明显降低(P＜0.05);单一α-GalCer刺激培养72 h后,实验组IL-4+iNKT、IFNγ+ iNKT的表达没有明显变化(P＞0.05),而阻断PD/PD-L1、Tim-3/Tim-3L和(或)活化CD28/CD80信号通路后,IL-4+iNKT、IFN-γ+ iNKT细胞的表达明显提高(P＜0.05).结论 慢性乙肝患者肝脏iNKT细胞功能存在明显的缺陷,并提示负向调控因子Tim-3、PD-1表达的增加和正向调控因子CD28表达的降低可能与iNKT细胞功能的下调密切相关.
关键词：慢性乙肝患者iNKT细胞Tim-3PD-1CD28
分类号：R512.6(传染病)
资助基金：国家自然科学基金(81172804)重庆市科委自然基金资助课题(CSTC,2010BB5381)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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