miR-638慢病毒载体的构建及其对MAPK14的靶向调控作用
邢译文1
刘鑫1
周林林1
白静1
范维宁1
徐广贤2
1.750004银川,宁夏医科大学检验学院2.750004银川,宁夏医科大学检验学院;750004银川,宁夏医科大学总医院医学实验中心
摘要：目的 构建miR-638慢病毒过表达载体,探讨其对MAPK 14基因的靶向调控作用.方法 分别构建pSicoR-miR-638及pMIR-Report-MAPK14过表达载体,应用双荧光素酶报告基因活性、Western blot及实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法验证miR-638与MAPK14的靶向调控关系.结果 经PCR、酶切及测序结果证明成功构建了pSicoR-miR-638及pMIR-Report-MAPK 14重组质粒,并通过实验证实miR-638过表达明能显抑制MAPK14的蛋白及mRNA表达(P＜0.05);抑制miR-638的表达,则MAPK14蛋白及mRNA的表达水平明显上调(P＜0.05).结论 成功构建pSicoR-miR-638慢病毒载体,并证实其可通过靶向作用于MAPK 14-3' UTR的特异序列而直接抑制MAPK 14基因的表达.
关键词：microRNAmiR-638MAPK14
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(31160494)新世纪优秀人才支持计划(NCET 11-11023)中国博士后科学基金特别资助项目(2012T50834)中国博士后科学基金(20110491554)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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