乙型肝炎病毒x基因转染HepG2细胞后差异表达基因的筛选
吴胜昔1
陈永文2
朱广倍3
费蕾2
吴玉章2
1.400054,重庆理工大学药学与生物工程学院;400038重庆,第三军医大学免疫学教研室2.400038重庆,第三军医大学免疫学教研室3.400054,重庆理工大学药学与生物工程学院
摘要：目的 建立稳定表达HBx蛋白的HepG2细胞系,利用基因芯片技术分析HBx转染肝癌细胞株引起的表达谱变化.方法 首先PCR扩增HBx基因片段,与真核表达载体pcDNA3.1(+)构建重组子,脂质体转染HepG2细胞经抗生素G418筛选后获得稳定表达HBx蛋白的HepG2细胞系,采用流式细胞术、Western blot鉴定HBx蛋白在细胞中的表达.利用基因芯片技术分析HBx转染肝癌细胞株引起的表达谱变化.结果 经HindⅢ和Xba Ⅰ内切酶酶切和测序鉴定表明成功构建了HBx基因真核表达载体,流式细胞术、Westem blot均证实HBx蛋白在HepG2细胞高效表达,基因芯片结果显示在检测的35 000个基因中有98个基因转录显著上调,24个基因转录显著下调.结论 成功构建了稳定、高效表达HBx的HepG2细胞,HBx转染HepG2细胞可导致部分基因显著差异表达,差异表达的基因可能参与了肝癌的发生发展.
关键词：乙型肝炎病毒x基因转染HepG2细胞基因芯片
分类号：R735.7(消化系肿瘤)
资助基金：重庆市基础与前沿研究计划项目(CSTC2013jcyjA10068)重庆市教委科学技术研究项目(KJ130802)重庆理工大学实验技术开发基金(SK201310)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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