LAT介导GPI锚固蛋白CD59对Jurkat细胞的生物学效应研究
王丽娜
高美华
王冰
丛蓓蓓
1.266071,青岛大学医学院免疫学教研室2.266071,青岛大学医学院免疫学教研室3.266071,青岛大学医学院免疫学教研室4.266071,青岛大学医学院免疫学教研室
摘要：目的 探讨在T系急性白血病的Jurkat细胞中,GPI类锚固蛋白CD59通过LAT介导的细胞增殖、活化、凋亡等相关的生物学效应,研究GPI锚固类膜蛋白分子对细胞调控的作用方式.方法 分别构建LAT-EGFP、neg-EGFP融合蛋白慢病毒载体,转染Jurkat细胞,建立稳定表达株(LAT-EGFP作为实验组,neg-EGFP转染空病毒组作为对照组).利用CD59单克隆抗体刺激实验组及对照组细胞后,通过CCK-8检测细胞的增殖活性,利用流式细胞术检测细胞凋亡状况,并通过激光共聚焦显微镜观察LAT与CD59分子在细胞中的定位表达.最后利用免疫印迹技术检测细胞内相关信号转导蛋白的表达情况.结果 CD59单抗交联刺激后,细胞增殖活性增加.实验组细胞出现明显晚期凋亡甚至坏死现象.而免疫荧光显示LAT-EGFP组细胞中LAT分子高亮聚集于脂筏区,相较于对照组细胞呈现明显的戒指环状.Western blot显示,CD59抗体交联后,ZAP70、Fyn 、LCK的表达均下降且LAT-EGFP组蛋白表达量低于对照组.结论 GPI锚固蛋白CD59通过T细胞活化连接蛋白LAT对T细胞信号转导发挥正向调控作用,转染LAT-EGFP的Jurkat细胞处于活化状态,LAT呈戒指环状定位于脂筏.
关键词：CD59Jurkat细胞信号转导
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81273206)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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